常用的细胞消化液包括胰蛋白酶(Trypsin)、EDTA、胶原酶等。这些消化液的主要功能是使细胞间的蛋白质(如细胞外基质)水解,改变细胞间的连接,从而将组织或细胞片分散成单个细胞,制成细胞悬液,以便进行进一步的实验。
中科百抗可提供Neptry胰酶细胞消化液,Neptry胰酶细胞消化液是一种来源于Fusarium oxysporum的胰蛋白酶样蛋白酶,该酶是从大肠杆菌中表达纯化而来。该酶与胰蛋白酶的酶切位点和pH活性范围一致,能对蛋白序列中精氨酸和赖氨酸的羧基端肽键进行切割。
Neptry胰酶细胞消化液在细胞实验中已被证实可以有效地解离贴壁生长哺乳动物细胞,具有与猪胰蛋白酶相似的解离动力学,并表现出较低的细胞毒性。纯度分析表明,Neptry胰酶相较于传统胰蛋白酶,纯度更高,分子更加稳定,活性保持更加优异。
Neptry胰酶细胞消化液可用于组织块的消化解离,获取原代细胞;贴壁细胞的传代消化以及微载体方法培养的细胞消化。
Neptry胰酶细胞消化液使用方法(以HEK293FT细胞为例):
本实验中T25培养的HEK293FT细胞去培养基后,使用10 mL PBS洗一次,加入1.7 mLNeptry胰酶,于37℃消化3min。使用8.3 mL完全培养基中和Neptry胰酶,将细胞吹散后使用细胞计数仪检测细胞数和活率。然后将1×106个细胞传代到新的T25培养瓶中观察细胞贴壁情况。
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