胎牛血清(FBS)是从胎牛全血中离心分离出来的血清,用于辅助培养基中的细胞生长。由于FBS富含生长因子,因此较常用于细胞研究。FBS是一种复杂的生物分子混合物,其含有粘附因子、生长因子、激素、脂质、转运蛋白等多种营养成分,这些对于体内和培养中的细胞生长和维持很重要。
未拆封的血清,一般情况下应存放在-10℃~-20℃,在产品有效期内均可使用。若一次无法用完一瓶,建议将血清无菌分装至合适大小的无菌离心管内,再放回冷冻,避免反复冻融,影响血清质量。胎牛血清对温度条件比较敏感,所以在对胎牛血清进行解冻时需要注意控制温度,避免影响血清性能。那么胎牛血清如何解冻呢?
不建议直接将胎牛血清放在4℃过夜解冻,也不建议直接将冷冻的血清放在37℃水浴或者温箱中解冻,因为血清改变的温度太大,非常容易产生沉淀物。解冻血清时,请注意将胎牛血清摇晃均匀,使其温度及成分均一,减少沉淀的发生。请勿将胎牛血清置于37℃太久,若在37℃放置太久,血清会变得混浊,同时血清中许多较不稳定的成分也会因此受到损害,而影响血清的质量。
解冻血清时,建议采用逐步解冻法(三步法),操作步骤如下:
操作
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温度
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100 mL
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500 mL
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1000 mL
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第一步
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室温
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35 min
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90 min
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100 min
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或15-20℃水浴
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5 min
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18 min
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20 min
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第二步
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20℃水浴
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15 min
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25 min
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30 min
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第三步
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37℃水浴
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20 min
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35 min
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45 min
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注意:
1.在水浴过程中,血清要完全浸入水中,同时在融化过程中要慢慢摇动瓶身混匀血清,但在摇动中尽量不要产生泡沫。
2.血清在解冻后,建议尽快使用,可以根据实验需求分装成单次用量,密封好后立即放回-20℃冰箱继续储存以供进一步使用,这样可以有效避免反复冻融的问题。
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