粪便DNA提取是一项新发展起来的从粪便中获取动物DNA并用于相关研究的技术,该技术有助于解决分子学研究中所遇到的取样难题。
随着粪便DNA提取技术的不断发展与完善,其越来越多地被应用于分子学研究中。粪便DNA的获取可以在不干扰,甚至无需观察到动物本身的情况下展开,因此避免了取样活动可能给动物带来的干扰或伤害,极大地促进了动物分子学的研究。至今,研究者们已经在粪便DNA提取技术上积累了丰富的经验,包括粪便样品采集、保存、DNA提取、PCR扩增以及等位基因分型等方面。
动物粪便样品中存在大量有意义的基因组DNA、其DNA主要来自动物自身脱落的消化道细胞、各种细菌(如大肠杆菌)或真菌等微生物、以及一些未消化食物样品的DNA、由于粪便中存在大量抑制因子,常规的DNA纯化方式不能有效地去除这些杂质,导致下游实验的失败,如PCR不能扩增出所需片段。
离心柱法粪便DNA提取采用特殊硅基质吸附材料,特异性吸附DNA,而RNA与蛋白质穿过。在正常情况下,核酸表面覆盖了一层由水分子组成的亲水薄膜,以维持其水溶性。高浓度盐离子的加入破坏了核酸表面亲水薄膜的相对有序排列,形成了疏水环境。在此环境中,核酸与硅胶膜能有效结合,而蛋白质、代谢产物和其他污染物则不能结合。
中科百抗离心柱法强力粪便基因组DNA提取试剂盒适用于从0.1~0.25g粪便样品中提取高纯度的微生物和宿主细胞DNA。本试剂盒采用有效的抑制因子吸附技术,并且配有的研磨珠可有效破碎粪便样本中的各种复杂成分,从而确保粪便DNA提取的完整性和高纯度。提取所得DNA产物可应用于PCR、杂交、STR、NGS等下游分子生物学实验。本产品使用安全方便,单个样本操作可在30分钟内完成。
使用该试剂盒时的注意事项:
1.样本应避免反复冻融,否则会导致DNA片段较小且提取得率下降;
2.在所有吸取上清液的步骤中应避免吸取到沉淀,否则会堵塞吸附柱,并影响DNA纯度;
3.建议充分混匀样本,如果样本混匀不充分可能会影响裂解效率,最终影响纯度和得率。