一、产品介绍
中科百抗Marsnuclease是一种由大肠杆菌(E. Coli)重组表达纯化的非特异性核酸内切酶,该酶不带任何蛋白标签,单体分子量约为28kD,可以切割和降解任何形式的DNA和RNA(单链、双链、线性、环状或超螺旋形式),它将核酸完全消化成3-5个碱基长度的5’-单磷酸寡核苷酸。对核酸碱基序列无特异性要求, 可在链内任意核苷酸间进行切割,广泛用于去除生物制品中的核酸。在纯化工艺中使用全能核酸酶,可有效降低细胞裂解液粘度,改善蛋白纯化工艺,高效去除重组蛋白制品核酸污染,大幅降低终产品污染风险,满足法规要求,在细胞治疗、病毒载体疫苗等领域应用广泛。
二、产品特点
1)去除核酸
去除各种重组蛋白制备过程中的核酸残留;
去除病毒疫苗和各种重组病毒中的核酸,以符合FDA相关指南中关于核酸污染的要求;
2)防止细胞聚集成团
存放的外周血单细胞的结块现象;
在细胞培养液中或某些细胞冻存液中加入适量全能核酸酶,可以防止细胞成团。
3)有效降低生物样本粘度
重组蛋白纯化或组织细胞样品蛋白提取时,全能核酸酶可以去除细胞或细菌裂解后释放的大量基因组DNA,有效降低样品粘度,便于下游操作和提高蛋白得率;
三、基本信息
1)条件参数
2)活性定义
1单位(U)定义等同于在50 mM Tris-HCl(pH 8.0), 2mM MgCl2缓冲液中37℃反应条件下将37 μg的鲑鱼精DNA完全消化成寡核苷酸所需要的酶量。
3)质量控制
SDS-PAGE检测纯度大于98%;
无蛋白酶活性检出;
内毒素含量≤20EU/mg;
比活:≥1.5x106U/mg。
4)订购信息
四、性能测试
1)Marsnuclease纯度
数据结果:图1Lane1-4分别为4.0/2.0/1.0/0.5µg Marsnuclease的SDS-PAGE图。
2)Marsnuclease效果
数据结果:图2 Degradation of DNA(A),DNA+RNA(B) contaminants in cell paste(CP) and conditioned media(CM) genetated from a bio-reactor. 2L of culture of CHO cell was harveated at day 10 ang total cell number reached 2*109.Amount of Marsnuclease were added:Lane 1&4:0U,Lane 2&5:1U,Lane 3&6:0.1U to treat 1*107 cell(CP) in 50µL of the buffer(20mM Tris-HCl,pH 8.0,1M Urea,1%Triton X-100) or 500mL of conditioned media(CM) and incubated at room temperature for 25min.
3)应用实例
图3和图4:将37μg小牛胸腺DNA和鲑鱼精DNA分别与0/2.0/1.0/0.5/2.0/1.0/0.5Unit(Lane1-7)Marsnuclease进行混合,37℃孵育30min后的琼脂糖凝胶电泳图。
Lane2-4:Marsnuclease;
Lane5-7:Supplier A