May.2024 13
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PEI转染试剂配制方法

细节

PEI(聚乙烯亚胺)是一种常用的转染试剂,广泛应用于生物学研究领域。作为一种基于阳离子聚合物的转染试剂,PEI具备高效、安全及适用范围广等诸多优点。其主要作用是将DNA包裹成带正电荷的微粒,从而避免DNA被降解。接着,这些带正电荷的微粒可以黏附于细胞表面的负电荷残基上,并通过胞吞作用进入细胞内。一旦进入细胞,PEIDNA的复合物会在低pH环境中释放,使DNA自由融合到细胞核内。

PEI转染试剂一般为粉末状,在使用前需要配制成溶液进行使用,PEI转染试剂的配制方法如下:

1.准确称取1.0 g PEI粉末,并将其溶解在800 mL细胞培养级水中。

注意:混合后可能残留微量固体。后续步骤中会除去这些残留固体,不会影响转染试剂性能。

2.PEI转染试剂中逐渐添加1.0 M氢氧化钠,同时用pH计监测,将pH调节至7.0 +/- 0.2。可添加氢氧化钠以充分溶解。

注意:应使用少于10 mL 1.0 M的氢氧化钠溶液。

3.添加细胞培养级水以配制PEI转染试剂,使总体积达到1000 mL

4.在无菌环境中,例如洁净的生物安全柜,用0.10.2μm过滤器对溶液进行无菌过滤后储存。

注意:推荐使用PES过滤膜。

5.配制好的PEI转染试剂在4°C下保存最多6个月。

注意:不要冻存。

如果您想了解更多关于PEI转染试剂配制方法的问题,请咨询中科百抗客服。