聚乙烯亚胺(PEI)是一种水溶性阳离子高分子聚合物,可用于将核酸(如DNA、RNA)引入目标细胞。PEI与核酸形成带正电的复合物,这些复合物被细胞摄取到细胞内。细胞将复合物封装到内部囊泡中,然后PEI能够诱导囊泡膜破裂或融合,使核酸释放到细胞质中。大多数核酸(如寡核苷酸、siRNA、mRNA等)留在细胞质中,发挥其功能。目前市面上有多种不同类型的PEI转染试剂,但大多只是在PEI的某些特殊的结构、分子量等方面稍有不同,其基本原理基本一致。那么,在使用PEI转染试剂时需要注意哪些问题呢?请随小编一起来了解一下。
1.PEI转染试剂对血清的敏感性如何?
由于血清中存在不确定的成分和蛋白因子,这些可能会影响转染效率。因此建议在转染前使用无血清或低血清(2%-5%)的细胞培养基进行细胞培养。然而,如果使用培养基作为质粒DNA与PEI孵育时的稀释液,在整个转染复合体形成的过程中,必须严格限制血清的使用(应使用无血清培养基作为稀释液),因为某些血清中的蛋白因子可能会阻碍质粒DNA与PEI的结合,导致转染效率下降。此外,预热新加入的培养基对细胞转染也有很大帮助。
2.聚乙烯亚胺(PEI)转染试剂是否适用于siRNA转染?
从原理上看,PEI转染试剂可以利用静电交互作用与带负电的核酸(DNA、mRNA、siRNA)结合,形成转染复合物,并被细胞摄取后在细胞内进行基因表达。如需了解具体的PEI使用比例,请查阅相关文献。
3.PEI转染试剂是否可以通过紫外线灭菌?
PEI转染试剂可以经过紫外线灭菌。紫外线灭菌是一种常见的方法,用于消除细菌、病毒和其他微生物。您可以将PEI溶液暴露在紫外线灯下,以确保其无菌。但是需要注意的是,紫外线灭菌可能会降低PEI的活性,因此在使用之前请检查其效果。
总而言之,使用PEI转染试剂时应遵循产品说明书的指导,避免其他因素影响PEI转染试剂的效果。如需了解更多关于PEI转染试剂的信息,请咨询中科百抗客服。