PBS缓冲液,是生物化学研究中使用最为广泛的一种缓冲液,主要成分为Na2HPO4、KH2PO4、NaCl和KCl,一般作为溶剂,起溶解保护试剂的作用。由于Na2HPO4和KH2PO4有二级解离,缓冲的pH值范围很广,而NaCl和KCl主要作用为增加盐离子浓度。如有需要PBS还可以补加1 mmol/L CaCl2和0.5 mmol/L MgCl2,以提供二价阳离子。
PBS是磷酸缓冲盐溶液的简称,一般有活性的生物制剂都要用它来稀释,原因就是它具有盐平衡、可调整的适宜pH缓冲作用;蒸馏水不具有盐平衡作用,可以破坏生物蛋白的结构及生物特性;生理盐水不具有调整pH的作用,对完整的、具有活性的物质不能保证其在最适条件下参与生物反应。所以使用PBS是首选。
Tris缓冲盐溶液简称TBS,属于常规pH缓冲液,常用于清洗免疫染色的组织或Western Blot中的蛋白印迹膜等,是常用分子生物学试剂。TBS缓冲液(0.05M,pH=7.4)主要由Tris、氯化钠、BSA、防腐剂等组成,可用于免疫金银染色中清洗组织,亦可作为封闭液的基础试剂。
TBS缓冲液是生物学中常使用的等渗缓冲盐溶液,主要用于免疫组化和原位杂交,酶联免疫等实验中,清洗免疫印迹实验中非特异性结合的抗体等。由Tris-HCl构成稳定的PH缓冲体系,NaCl提供等渗条件。4℃保存可延长产品保质期,长期不用建议低温保存。若产品出现结晶析出,请置于37℃水浴至完全溶解。
PBS的缓冲能力强于TBS(因为混合缓冲液在一定的离子强度下常常具有更宽的缓冲范围),TBS在PH7.0以下缓冲能力较弱(不过PBS易污染) 。但我们常常要根据我们实验目的选用合适的缓冲液,如在蛋白纯化中进行阴离子交换层析,阳离子缓冲液首选TBS;阳离子交换层析时,阴离子缓冲液则首选PBS。
客户根据实际情况以及PBS缓冲液和TBS缓冲液区别进行选择合适的缓冲液,传统配制的电泳缓冲液,均依托于实验操作人员的水平,无标准质控体系,故无法保证每批次缓冲液一致,极易导致实验重复性差甚至实验失败等结果,人力成本逐渐上升,故中科百抗采用药物制剂技术,将缓冲液粉剂以速溶颗粒形式呈现,免除配置缓冲液的枯燥过程,同时保证试剂一致性,实验均一性。