使用该组织保存液分别保存小鼠肺组织0小时、24小时、48小时,然后将该组织消化解离为单细胞悬液,利用CountStar全自动细胞荧光分析仪检测细胞活性(AO/PI染色)、结团率、活细胞浓度、细胞直径等参数,然后进行10x Genomics平台单细胞建库测序,获取数据。 |
悬液质检结果:未经保存的组织制备的单细胞悬液活性可达97.44%;保存24小时后活性仍可在90%以上,达到93.54%;保存48小时后活性为86.66%;同时,结团率等参数也均能满足高通量单细胞测序研究相关实验要求。 |
数据分析结果:曲线图、捕获细胞数、测序深度、获得基因数结果初步可以看出,数据结果比较理想,并且重复性较好,不同保存时间组织得到基因中位数均在1,500个左右,也较为理想。 |