PEI线性转染试剂是一种高性能转染试剂,专为稳健、低成本和可扩展的瞬时基因表达而设计。 PEI 线性转染试剂是用于瞬时转染 HEK293 和 CHO 悬浮培养物的最常用试剂。 PEI线性转染试剂是在哺乳动物表达系统中生产重组蛋白、抗体和病毒(AAV、BV 等)的首选试剂。
规格: 1 mL
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PEI线性转染试剂是一种高性能转染试剂,专为稳健、低成本和可扩展的瞬时基因表达而设计。 PEI 线性转染试剂是用于瞬时转染HEK293和CHO悬浮培养物的最常用试剂。PEI线性转染试剂是在哺乳动物表达系统中生产重组蛋白、抗体和病毒(AAV、BV 等)的首选试剂。 |
以HEK293细胞为例:
1.转染前,确保细胞存活率大于95%,活细胞密度在(1.5~2.0)×106 cells/mL之间;
2.将活细胞密度稀释至1.05×106 cells/mL; 3.将pDNA和1 mg/mL Bestop™PEI线性转染试剂颠倒数次,混匀; 4.每毫升待转染培养物转1 μg pDNA到一个干净的小瓶中。用新鲜培养基稀释至20 μg/mL(5%最终培养体积)。 5.每毫升待转染培养物转3 μL 1 mg/mL Bestop™PEI线性转染试剂至干净的小瓶中。用培养基稀释至60 μg/mL(5%最终培养体积)。 6.将稀释的pDNA和Bestop™PEI线性转染试剂混合。颠倒几次,在室温下静置10分钟。使用前将密封的容器轻轻颠倒一次。 7.每90 mL培养基转染10 mL pDNA/PEI混合物。在混合的同时逐渐将混合物加入到培养基中,孵育细胞。 8.转染后:如果使用增强剂或补充剂,可以在转染后6小时的任何时间添加。传代培养也可以在6小时后进行。 如果使用GFP对照,48小时后应观察到转染率超过70%。对于优化过的方法,80%以上的转染率是合理的。 ·特别提醒:初次使用PEI进行转染时,请先优化出适合自己实验的最佳DNA和PEI比例。 |